技术平台

三启生物拥有超过10年积淀的体细胞重编程（iPSC）、基因编辑（ZEN/TALEN/CRISPR）、定向分化技术平台，其中高效的iPSC来源造血谱系定向分化技术是这三个平台综合运用能力的体现。四大平台极大提升了通用型现货式免疫细胞药物开发效率，以及再生医学管线的开发潜能。

1.iPSCell^® 平台

自2010年以来，体细胞重编程技术一直是CIB的研究重点内容，经过多年的研究，CIB熟练掌握了3种最常用的重编程方案：经典的逆转录病毒重编程、Episome质粒介导的重编程和仙台病毒介导的重编程，其中后面两种重编程为非整合方式，在临床应用方面具有很大潜力。

经过优化整个重编程的流程，我们可以无创获得尿液细胞或血液细胞，并在短期内重编程得到高质量的iPSC，成功率超过90%。这些iPSCs可以定向分化成多种类型的细胞，如神经细胞、心肌细胞、肝脏细、β细胞、RPE细胞等，从而为基础研究、药物开发和个性化医疗提供新工具。

细胞重编程流程及重编程过程中细胞的形态变化

非整合iPSC的鉴定
A：hiPSCs多能性标记物检测；B：Transgene外源基因沉默检测；C：体外分化实验（EB形成）；D：OCT4和NANOG启动子甲基化分析；E：核型分析；F：FACS检测hiPSCs表面标记物；G畸胎瘤形成实验；H：仙台病毒外源基因整合检测

通过iPSCelll^®平台的积累，CIB在细胞株重编程、扩增、质控方面有丰富的经验。目前我们已经得到了来自不同个体和不同组织类型的超过50株iPS细胞株，其中包括超过20株的非整合iPSC细胞株，以及3株临床级别iPS细胞株。

CIB临床级别iPSC细胞株，在工艺、物料、指控、放行等方面上严格符合cGMP标准。

CIB生产的临床级iPS细胞株符合CDE最新颁布的《人源性干细胞及其衍生细胞治疗产品临床试验技术指导原则（试行）》中的管理要求，在物料选择遵循《T/CMBA 021-2023》标准。

2.Cell Designer 平台

经过精心“设计”的iPS胞可以用于分化成各种特定类型的细胞，如胰岛细胞、神经元、肝细胞等，这些细胞可以用于组织修复、器官移植和其他再生医学应用。

CIB早在2010年就和Sigma-Aldrich ZFN科学家联合开展利用ZFN对iPSC的基因修饰，两年完成超过10株iPSC的基因修饰，目前，CIB的Cell Designer 平台可以基于TALEN，CRISPR进行基因敲入、基因敲除工作。

基因敲除
基因修复
Reporter细胞
基因过表达

CIB拥有稳定的基因敲除平台，利用TALEN和CRISPR/Cas9,我们可以快速对不同细胞株进行基因敲除

ssODNs介导的基因修复/点突变具有footprint-free，简便快捷等特点，近年来已经成为基因修饰的热门工具。

NKX2.5 GFP-PURO/wt KI iPSC构建示意图

基于AAVS1位点的ADAG基因过表达（ADAG：阿尔兹海默症相关基因）

3.PSCDiffer^® 平台

神经干细胞
多种神经细胞
肝细胞
β细胞
视网膜色素上皮细胞

CIB的NSCs有来自于健康人、胚胎干细胞、阿尔兹海默病人以及帕金森疾病 Park 7-/- 的iPSCs。该类型细胞可用于进一步分化为各类神经元细胞与神经胶质细胞，比如混合神经元、多巴胺神经元、运动神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞等。所得细胞可用于各类科研用途以及神经毒性测试，神经保护剂筛查等。